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赛库小课堂 | K7M2-WT这些生长培养要点你知道吗?
人阅读 发布时间:2024-04-24 09:43
近期有朋友反映K7M2这个细胞培养过程中形态呈现出细胞触角多、拉丝的特点,那这到底是不是正常生长形态呢?今天我们来了解下这个细胞正常生长形态及相关要点。
附上K7M2(小鼠骨髓瘤成骨细胞)简介:
▲ 形态特征:成骨细胞样
▲ 生长特征:贴壁
▲ 种 属:小鼠源
▲ 组织来源:骨
▲ 疾 病:骨肉瘤
推荐培养试剂
▲ 基础培养基:DMEM,high glucose(CellCook:CM2016或Gibco cat:11995,或同配方)
▲ 血 清: 南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)
▲ 传代方法:1:2-1:4传代(培养面积比)
▲ 传代方式:消化2-3分钟
▲ 换液频率:2~3天换液1次
▲ 冻存液配方:DMEM,high glucose+10%FBS+ 1 0%DMSO
▲ 难度等级:++
▲ 特征特性:抗原表达:CD31阳性;产物:八因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglyan、decorrin、villin2(ezrin)。骨唾液酸蛋白,biglyan,decorrin和osteopontin的表达显示其骨家族细胞特性。
废话不多,直接放ATCC官方图如下:
CellCook图片:
图片显示,细胞形态为成纤维细胞样,贴壁生长,细胞触角多且向四周发散拉伸生长,这都是细胞正常生长状态。该细胞贴壁不牢,会有部分细胞悬浮,如果悬浮细胞太多可离心收集起来。
培养中需注意几点:
▲ 1、该细胞有密度依赖,密度低时生长缓慢,需注意细胞培养密度,保证培养效果。
▲ 2、细胞复苏时注意“快融”原则,宜一分钟内全部溶解。
▲ 3、配制冻存液时注意DMSO配制时会发热易灼伤细胞,所以需等冻存液冷却后再使用。
▲ 4、传代消化时一般消化2-3min,消化时间可根据细胞消化程度进行适当调整,注意勿消化过度。
▲ 5、该细胞对外界刺激较敏感,建议培养时使用新鲜DMEM高糖培养基,注意培养基颜色变化,如变紫需及时更换新鲜培养基。
赛库生物
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