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赛库小课堂 | K7M2-WT这些生长培养要点你知道吗?

人阅读 发布时间:2024-04-24 09:43

      近期有朋友反映K7M2这个细胞培养过程中形态呈现出细胞触角多、拉丝的特点,那这到底是不是正常生长形态呢?今天我们来了解下这个细胞正常生长形态及相关要点。

 

附上K7M2(小鼠骨髓瘤成骨细胞)简介:

▲  形态特征:成骨细胞样

▲  生长特征:贴壁

▲  种 属:小鼠源

▲  组织来源:骨

▲  疾 病:骨肉瘤

 

推荐培养试剂

▲  基础培养基:DMEM,high glucose(CellCook:CM2016或Gibco cat:11995,或同配方)

▲  血 清: 南美胎牛血清(CellCook cat:CM1002L)

▲  传代方法:1:2-1:4传代(培养面积比)

▲  传代方式:消化2-3分钟

▲  换液频率:2~3天换液1次

▲ 冻存液配方:DMEM,high glucose+10%FBS+ 1 0%DMSO

▲  难度等级:++

▲  特征特性:抗原表达:CD31阳性;产物:八因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglyan、decorrin、villin2(ezrin)。骨唾液酸蛋白,biglyan,decorrin和osteopontin的表达显示其骨家族细胞特性。

 

废话不多,直接放ATCC官方图如下:

 



CellCook图片:

 

   

图片显示,细胞形态为成纤维细胞样,贴壁生长,细胞触角多且向四周发散拉伸生长,这都是细胞正常生长状态。该细胞贴壁不牢,会有部分细胞悬浮,如果悬浮细胞太多可离心收集起来。

 

培养中需注意几点:

▲ 1、该细胞有密度依赖,密度低时生长缓慢,需注意细胞培养密度,保证培养效果。

▲ 2、细胞复苏时注意“快融”原则,宜一分钟内全部溶解。

▲ 3、配制冻存液时注意DMSO配制时会发热易灼伤细胞,所以需等冻存液冷却后再使用。

▲  4、传代消化时一般消化2-3min,消化时间可根据细胞消化程度进行适当调整,注意勿消化过度。

▲ 5、该细胞对外界刺激较敏感,建议培养时使用新鲜DMEM高糖培养基,注意培养基颜色变化,如变紫需及时更换新鲜培养基。

 

 

赛库生物

赛库(Cellcook)是一家专注于细胞相关技术、服务及产品的高科技企业,公司坐落在优雅美丽的广州国际生物岛。赛库(Cellcook)聘请多名生命科学领域的国家杰出青年基金获得者作为科学顾问,同时拥有朝气蓬勃的年轻队伍,具有强大的研发和技术支持能力。赛库(Cellcook)提供细胞整体解决方案,建立了完善鉴定、种类齐全的细胞资源库,并提供专业的细胞相关技术服务和配套试剂。公司已建立完整的研发、生产和质控体系,在广州国际生物岛拥有高标准研发实验室与细胞工厂,保证了为客户提供优异的产品及服务。我们的客户已经覆盖全中国所有的地区,涵盖的领域包括医学科研实验室、生物制药研发中心、分子诊断企业研发中心等。我们密切注视细胞技术领域的发展,并且致力于相关前沿技术的应用转化。

 

地址:广州国际生物岛标产一期办公区一栋102单元

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